Садржај
- фазе
- Метода 1 Посматрајте бактерије директно
- Метода 2 Мерење биомасе
- Метода 3 Наставите турбидиметријом
Постоји неколико начина за мерење раста бактерија, а неки су тежи од имплементације других. Најједноставније се најчешће користе и дају релативно тачне резултате, под условом да буду ригорозне током мерења. Најчешће технике су посматрање и бројање бактерија, мерење биомасе и суве биомасе и турбидиметрија. Ваша школска лабораторија треба да има опрему потребну за бар једну од ових метода.
фазе
Метода 1 Посматрајте бактерије директно
-
Припремите опрему. Поред онога што се обично налази у свим лабораторијама за биологију, требаће вам и неке конкретне ствари. Обавезно држите све инструменте и контејнере при руци, тако да не морате да се враћате напред-назад у ормару где се опрема чува. Унапријед размислите шта ћете учинити како бисте знали шта ћете користити у свакој фази. Мораћете да знате и неке кључне појмове.- Набавите хемацитометар. То је сечиво са бројачким коморама које је повезано са микроскопом. То је врло једноставан инструмент за подешавање и употребу. Можете пронаћи неке од добављача специјализованих за опрему за школе и истраживачке лабораторије. Обично се даје кориснички приручник.
- Узми петријеву посуду. Ово је мали, округли, плитки контејнер у коме можете посматрати бактерије.
- Израз "култура" односи се на микроорганизам који се вештачки размножава као део научног експеримента.
- „Бујот културе“ је медиј у којем ће се култура развијати.
-
Користите петријеву посуду. Ставите бактерије у кутију и посматрајте је под микроскопом. Можете је поставити и директно на слајд. Затим пребројите број присутних бактеријских ћелија. -
Обавезно проверите концентрацију. Ако има превише бактерија, оне ће се преклапати и нећете их моћи правилно пребројати. Ако је то случај, разриједите културу мешајући је са мало бујона. Ако их је премало, резултат неће бити значајан. Затим морате филтрирати јуху да бисте повећали концентрацију. -
Бројите бактерије. Последњи корак је једноставно бројање. Погледајте микроскопске коморе под микроскопом и забележите број ћелија које видите. Упоредите резултат са другим сличним искуствима.
Метода 2 Мерење биомасе
-
Проверите да ли имате потребне инструменте. Ова метода је лака за примену и укључује употребу скупе опреме. Ако је не оперете, користите другу технику. С друге стране, ако лабораторија у којој се налазите има праве алате, мерење биомасе и суве масе је идеално јер даје тачне резултате. Требате:- хидраулична пећ са присилном конвекцијом,
- алуминијумска вага,
- неколико Ерленмајерових тиквица,
- центрифуга или систем за лабораторијску филтрацију.
-
Проверите да ли је усев у тиквици Ерленмеиер. Ако то није случај, сипајте га. У овој фази експеримента, бактерије су још увек у бујону културе. Касније ће бити раздвојени. -
Осушите посуду за вагање. За то га ставите у рерну. Такође можете користити мембрански филтер целулозни ацетат пречника 47 мм са порама 0,45 µм. Без обзира на то који се алат користи, измерите његову масу тачно тако да се може одузети од резултата које сте добили када се усев постави на њега. -
Мик. Промесајте лерленмеиер тако да култура буде хомогена. Заправо, због гравитације, ћелије природно теже падају на дно посуде. Тако да морате мало протрести која су распоређена на једноличан начин и да је ваш узорак репрезентативнији. -
Центрифуга. Помоћу центрифуге одвојите бактерије од бујона. Овај уређај се користи за окретање контејнера и протутеже врло великом брзином. Јуха тече, што задржава само живу материју. За додатне информације на Интернету ћете пронаћи информације о томе како користити центрифугу. -
Набавите тесто. Баци га на понев за вагање. Можете бацити бујон за културу, неће вам више требати, али држите лерленмеиер при руци. -
Исперите центрифугу. Улијте воду за испирање у посуду за вагање поред бактеријских ћелија. Резултат добијен за све даје вам биомасу. -
Пронађите суву масу. Да бисте упознали суву биомасу свог узорка, ставите посуду за вагање у рерну на 100 ° Ц на период од 6 до 24 сата, у складу са упутствима испорученим са вашим уређајем. Пазите да не прекорачите ову температуру да не би изгореле бактерије. Затим све одмерите, а затим одузмите масу тепсије.
Метода 3 Наставите турбидиметријом
-
Припремите своју опрему. Требаће вам извор светлости и спектрофотометар, уређај који се налази у већини научних лабораторија. Погледајте приложени кориснички приручник јер сваки модел има свој рад. Ова метода је једна од најчешће коришћених за мерење раста бактерија, јер захтева само јефтине и једноставне алате. -
Унесите светло у културу. Замућеност се користи за процену садржаја течности у честицама, а треба одредити да ли је више или мање облачно. Резултат који ћете добити овим мерењем биће дат у НТУ (или нефелометријским јединицама мутноће). Можда ће бити потребно извршити калибрацију уређаја да би се тачно измерило замућеност узорка. -
Водите белешке. Замућеност је количина бактерија у узорку. Спектрофотометар ће вам такође омогућити да знате пропусност раствора (% Т), чија је вредност обрнуто пропорционална вредности мутноће. Затим упоредите резултате добијене на различитим узорцима за мерење раста бактерија.